I ricercatori hanno sviluppato nanoparticelle in grado di penetrare nella retina neurale e fornire mRNA alle cellule dei fotorecettori il cui corretto funzionamento rende possibile la visione.

Gli scienziati dell’Oregon State University College of Pharmacy hanno dimostrato in modelli animali la possibilità di utilizzare nanoparticelle lipidiche e RNA messaggero, la tecnologia alla base dei vaccini COVID-19, per trattare la cecità associata a una rara condizione genetica.

Lo studio è stato pubblicato oggi (11 gennaio 2023) sulla rivista I progressi della scienza. È stato guidato dal professore associato di scienze farmaceutiche dell’OSU Gaurav Sahay, dallo studente di dottorato dell’Oregon State Marco Herrera-Barrera e dall’assistente professore di oftalmologia dell’Oregon Health & Science University Renee Ryals.

Gli scienziati hanno superato quella che era stata la principale limitazione dell’utilizzo di nanoparticelle lipidiche, o LNP, per trasportare materiale genetico ai fini della terapia della vista, facendole raggiungere la parte posteriore dell’occhio, dove si trova la retina.

I lipidi sono acidi grassi e composti organici simili tra cui molti oli e cere naturali. Le nanoparticelle sono minuscoli pezzi di materiale di dimensioni variabili da uno a 100 miliardesimi di metro. L’RNA messaggero fornisce istruzioni alle cellule per produrre una particolare proteina.

Con i vaccini contro il coronavirus, l’mRNA trasportato dagli LNP istruisce le cellule a creare un pezzo innocuo della proteina spike del virus, che innesca una risposta immunitaria dal corpo. Come terapia per la compromissione della vista derivante dalla degenerazione retinica ereditaria, o IRD, l’mRNA istruirebbe le cellule dei fotorecettori – difettose a causa di una mutazione genetica – a produrre le proteine ​​necessarie per la vista.

L’IRD comprende un gruppo di disturbi di varia gravità e prevalenza che colpiscono una persona su poche migliaia in tutto il mondo.

Gli scienziati hanno dimostrato, in una ricerca che ha coinvolto topi e primati non umani, che gli LNP dotati di peptidi erano in grado di passare attraverso le barriere negli occhi e raggiungere la retina neurale, dove la luce viene trasformata in segnali elettrici che il cervello converte in immagini.

“Abbiamo identificato un nuovo set di peptidi che possono raggiungere la parte posteriore dell’occhio”, ha detto Sahay. “Abbiamo usato questi peptidi per agire come codici postali per consegnare nanoparticelle che trasportano materiali genetici all’indirizzo previsto all’interno dell’occhio”.

“I peptidi che abbiamo scoperto possono essere usati come ligandi mirati direttamente coniugati a RNA silenzianti, piccole molecole per terapie o come sonde di imaging”, ha aggiunto Herrera-Barrera.

Sahay e Ryals hanno ricevuto una sovvenzione di 3,2 milioni di dollari dal National Eye Institute per continuare a studiare la promessa delle nanoparticelle lipidiche nel trattamento della cecità ereditaria. Condurranno la ricerca sull’uso degli LNP per fornire uno strumento di editing genetico che potrebbe eliminare i geni cattivi nelle cellule dei fotorecettori e sostituirli con geni correttamente funzionanti.

La ricerca mira a sviluppare soluzioni per le limitazioni associate all’attuale principale mezzo di consegna per l’editing genetico: un tipo di virus noto come virus adeno-associato o AAV.

“L’AAV ha una capacità di confezionamento limitata rispetto agli LNP e può provocare una risposta del sistema immunitario”, ha affermato Sahay. “Inoltre, non funziona in modo fantastico nel continuare a esprimere gli enzimi che lo strumento di modifica utilizza come forbici molecolari per eseguire tagli nel DNA da modificare. Speriamo di utilizzare ciò che abbiamo appreso finora sugli LNP per sviluppare un sistema di consegna dell’editor di geni migliorato”.

Riferimento: “Le nanoparticelle lipidiche guidate da peptidi forniscono mRNA alla retina neurale di roditori e primati non umani” 11 gennaio 2023, I progressi della scienza.
DOI: 10.1126/sciadv.add4623

Lo studio LNP guidato dai peptidi è stato finanziato dal National Institutes of Health. Hanno partecipato alla ricerca per l’Oregon State anche i docenti del College of Pharmacy Oleh Taratula e Conroy Sun, i ricercatori post-dottorato Milan Gautam e Mohit Gupta, gli studenti di dottorato Antony Jozic e Madeleine Landry, l’assistente di ricerca Chris Acosta e lo studente universitario Nick Jacomino, uno studente di bioingegneria al College di Ingegneria che si è laureata nel 2020.

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Le morbide fibre ottiche bloccano il dolore durante i movimenti e gli allungamenti del corpo

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Gli ingegneri del MIT hanno sviluppato fibre morbide e impiantabili in grado di fornire luce ai nervi principali attraverso il corpo. Quando questi nervi vengono manipolati geneticamente per rispondere alla luce, le fibre possono inviare impulsi di luce ai nervi per inibire il dolore. Le fibre ottiche sono flessibili e si allungano con il corpo.

Le nuove fibre sono intese come uno strumento sperimentale che può essere utilizzato dagli scienziati per esplorare le cause e i potenziali trattamenti per i disturbi dei nervi periferici nei modelli animali. Il dolore ai nervi periferici può verificarsi quando i nervi esterni al cervello e al midollo spinale sono danneggiati, provocando formicolio, intorpidimento e dolore negli arti colpiti. Si stima che la neuropatia periferica colpisca più di 20 milioni di persone negli Stati Uniti.

“Gli attuali dispositivi utilizzati per studiare i disturbi nervosi sono realizzati con materiali rigidi che limitano il movimento, quindi non possiamo realmente studiare le lesioni del midollo spinale e il recupero se è coinvolto il dolore”, afferma Siyuan Rao, assistente professore di ingegneria biomedica presso l’Università del Massachusetts. ad Amherst, che ha svolto parte del lavoro come postdoc al MIT. “Le nostre fibre possono adattarsi al movimento naturale e svolgere il loro lavoro senza limitare il movimento del soggetto. Questo può darci informazioni più precise”.

“Ora, le persone hanno uno strumento per studiare le malattie legate al sistema nervoso periferico, in condizioni molto dinamiche, naturali e non vincolate”, aggiunge Xinyue Liu PhD ’22, che ora è assistente professore alla Michigan State University (MSU).

I dettagli delle nuove fibre del loro team saranno riportati in uno studio apparso su Metodi naturali. I coautori del MIT di Rao e Liu includono Atharva Sahasrabudhe, uno studente laureato in chimica; Xuanhe Zhao, professore di ingegneria meccanica e ingegneria civile e ambientale; e Polina Anikeeva, professoressa di scienza e ingegneria dei materiali, insieme ad altri presso MSU, UMass-Amherst, Harvard Medical School e National Institutes of Health.

Oltre il cervello

Il nuovo studio è nato dal desiderio del team di espandere l’uso dell’optogenetica oltre il cervello. L’optogenetica è una tecnica mediante la quale i nervi vengono geneticamente modificati per rispondere alla luce. L’esposizione a quella luce può quindi attivare o inibire il nervo, il che può fornire agli scienziati informazioni su come funziona il nervo e interagisce con l’ambiente circostante.

I neuroscienziati hanno applicato l’optogenetica negli animali per tracciare con precisione i percorsi neurali alla base di una serie di disturbi cerebrali, tra cui la dipendenza, il morbo di Parkinson e i disturbi dell’umore e del sonno – informazioni che hanno portato a terapie mirate per queste condizioni.

Fino ad oggi, l’optogenetica è stata impiegata principalmente nel cervello, un’area priva di recettori del dolore, che consente l’impianto relativamente indolore di dispositivi rigidi. Tuttavia, i dispositivi rigidi possono comunque danneggiare i tessuti neurali. Il team del MIT si è chiesto se la tecnica potesse essere estesa ai nervi esterni al cervello. Proprio come nel cervello e nel midollo spinale, i nervi del sistema periferico possono subire una serie di disturbi, tra cui sciatica, malattia dei motoneuroni e intorpidimento e dolore generali.

L’optogenetica potrebbe aiutare i neuroscienziati a identificare le cause specifiche dei disturbi dei nervi periferici e a testare terapie per alleviarli. Ma l’ostacolo principale all’implementazione della tecnica oltre il cervello è il movimento. I nervi periferici sperimentano una costante spinta e trazione da parte dei muscoli e dei tessuti circostanti. Se nella periferia venissero utilizzati dispositivi rigidi in silicio, limiterebbero il movimento naturale dell’animale e potrebbero causare danni ai tessuti.

Cristalli e luce

I ricercatori hanno cercato di sviluppare un’alternativa che potesse funzionare e muoversi con il corpo. Il loro nuovo design è una fibra morbida, elastica e trasparente realizzata in idrogel, un mix gommoso e biocompatibile di polimeri e acqua, il cui rapporto è stato sintonizzato per creare minuscoli cristalli di polimeri su scala nanometrica sparsi in una soluzione più simile alla gelatina.

La fibra comprende due strati: un nucleo e un guscio esterno o “rivestimento”. Il team ha mescolato le soluzioni di ogni strato per generare una specifica disposizione cristallina. Questa disposizione conferiva a ciascuno strato un indice di rifrazione specifico e diverso e insieme gli strati impedivano alla luce che viaggiava attraverso la fibra di fuoriuscire o disperdersi.

Il team ha testato le fibre ottiche nei topi i cui nervi erano stati geneticamente modificati per rispondere alla luce blu che avrebbe eccitato l’attività neurale o alla luce gialla che avrebbe inibito la loro attività. Hanno scoperto che anche con la fibra impiantata, i topi erano in grado di correre liberamente su una ruota. Dopo due mesi di esercizi con la ruota, per un totale di circa 30.000 cicli, i ricercatori hanno scoperto che la fibra era ancora robusta e resistente alla fatica e poteva anche trasmettere la luce in modo efficiente per innescare la contrazione muscolare.

Il team ha quindi acceso un laser giallo e lo ha fatto passare attraverso la fibra impiantata. Utilizzando procedure di laboratorio standard per valutare l’inibizione del dolore, hanno osservato che i topi erano molto meno sensibili al dolore rispetto ai roditori che non erano stati stimolati con la luce. Le fibre sono state in grado di inibire significativamente il dolore sciatico nei topi stimolati dalla luce.

I ricercatori vedono le fibre come un nuovo strumento che può aiutare gli scienziati a identificare le radici del dolore e di altri disturbi dei nervi periferici.

“Ci stiamo concentrando sulla fibra come nuova tecnologia neuroscientifica”, afferma Liu. “Speriamo di aiutare a analizzare i meccanismi alla base del dolore nel sistema nervoso periferico. Con il tempo, la nostra tecnologia potrebbe aiutare a identificare nuove terapie meccanicistiche per il dolore cronico e altre condizioni debilitanti come la degenerazione o le lesioni dei nervi”.

Questa ricerca è stata sostenuta, in parte, dal National Institutes of Health, dalla National Science Foundation, dall’Ufficio di ricerca dell’esercito americano, dal McGovern Institute for Brain Research, dall’Hock E. Tan e dal K. Lisa Yang Center for Autism Research, dal K Lisa Yang Brain-Body Center e la Brain and Behavior Research Foundation.



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