I ricercatori hanno sviluppato nanoparticelle in grado di penetrare nella retina neurale e fornire mRNA alle cellule dei fotorecettori il cui corretto funzionamento rende possibile la visione.

Gli scienziati dell’Oregon State University College of Pharmacy hanno dimostrato in modelli animali la possibilità di utilizzare nanoparticelle lipidiche e RNA messaggero, la tecnologia alla base dei vaccini COVID-19, per trattare la cecità associata a una rara condizione genetica.

Lo studio è stato pubblicato oggi (11 gennaio 2023) sulla rivista I progressi della scienza. È stato guidato dal professore associato di scienze farmaceutiche dell’OSU Gaurav Sahay, dallo studente di dottorato dell’Oregon State Marco Herrera-Barrera e dall’assistente professore di oftalmologia dell’Oregon Health & Science University Renee Ryals.

Gli scienziati hanno superato quella che era stata la principale limitazione dell’utilizzo di nanoparticelle lipidiche, o LNP, per trasportare materiale genetico ai fini della terapia della vista, facendole raggiungere la parte posteriore dell’occhio, dove si trova la retina.

I lipidi sono acidi grassi e composti organici simili tra cui molti oli e cere naturali. Le nanoparticelle sono minuscoli pezzi di materiale di dimensioni variabili da uno a 100 miliardesimi di metro. L’RNA messaggero fornisce istruzioni alle cellule per produrre una particolare proteina.

Con i vaccini contro il coronavirus, l’mRNA trasportato dagli LNP istruisce le cellule a creare un pezzo innocuo della proteina spike del virus, che innesca una risposta immunitaria dal corpo. Come terapia per la compromissione della vista derivante dalla degenerazione retinica ereditaria, o IRD, l’mRNA istruirebbe le cellule dei fotorecettori – difettose a causa di una mutazione genetica – a produrre le proteine ​​necessarie per la vista.

L’IRD comprende un gruppo di disturbi di varia gravità e prevalenza che colpiscono una persona su poche migliaia in tutto il mondo.

Gli scienziati hanno dimostrato, in una ricerca che ha coinvolto topi e primati non umani, che gli LNP dotati di peptidi erano in grado di passare attraverso le barriere negli occhi e raggiungere la retina neurale, dove la luce viene trasformata in segnali elettrici che il cervello converte in immagini.

“Abbiamo identificato un nuovo set di peptidi che possono raggiungere la parte posteriore dell’occhio”, ha detto Sahay. “Abbiamo usato questi peptidi per agire come codici postali per consegnare nanoparticelle che trasportano materiali genetici all’indirizzo previsto all’interno dell’occhio”.

“I peptidi che abbiamo scoperto possono essere usati come ligandi mirati direttamente coniugati a RNA silenzianti, piccole molecole per terapie o come sonde di imaging”, ha aggiunto Herrera-Barrera.

Sahay e Ryals hanno ricevuto una sovvenzione di 3,2 milioni di dollari dal National Eye Institute per continuare a studiare la promessa delle nanoparticelle lipidiche nel trattamento della cecità ereditaria. Condurranno la ricerca sull’uso degli LNP per fornire uno strumento di editing genetico che potrebbe eliminare i geni cattivi nelle cellule dei fotorecettori e sostituirli con geni correttamente funzionanti.

La ricerca mira a sviluppare soluzioni per le limitazioni associate all’attuale principale mezzo di consegna per l’editing genetico: un tipo di virus noto come virus adeno-associato o AAV.

“L’AAV ha una capacità di confezionamento limitata rispetto agli LNP e può provocare una risposta del sistema immunitario”, ha affermato Sahay. “Inoltre, non funziona in modo fantastico nel continuare a esprimere gli enzimi che lo strumento di modifica utilizza come forbici molecolari per eseguire tagli nel DNA da modificare. Speriamo di utilizzare ciò che abbiamo appreso finora sugli LNP per sviluppare un sistema di consegna dell’editor di geni migliorato”.

Riferimento: “Le nanoparticelle lipidiche guidate da peptidi forniscono mRNA alla retina neurale di roditori e primati non umani” 11 gennaio 2023, I progressi della scienza.
DOI: 10.1126/sciadv.add4623

Lo studio LNP guidato dai peptidi è stato finanziato dal National Institutes of Health. Hanno partecipato alla ricerca per l’Oregon State anche i docenti del College of Pharmacy Oleh Taratula e Conroy Sun, i ricercatori post-dottorato Milan Gautam e Mohit Gupta, gli studenti di dottorato Antony Jozic e Madeleine Landry, l’assistente di ricerca Chris Acosta e lo studente universitario Nick Jacomino, uno studente di bioingegneria al College di Ingegneria che si è laureata nel 2020.

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L’intelligenza artificiale aiuta gli scienziati a progettare le piante per combattere il cambiamento climatico

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Il Gruppo intergovernativo sui cambiamenti climatici (IPCC) ha dichiarato che la rimozione del carbonio dall’atmosfera è ormai essenziale per combattere il cambiamento climatico e limitare l’aumento della temperatura globale. Per sostenere questi sforzi, gli scienziati del Salk stanno sfruttando la capacità naturale delle piante di estrarre l’anidride carbonica dall’aria ottimizzando i loro sistemi radicali per immagazzinare più carbonio per un periodo di tempo più lungo.

Per progettare queste piante salva-clima, gli scienziati della Harnessing Plants Initiative di Salk stanno utilizzando un nuovo sofisticato strumento di ricerca chiamato SLEAP, un software di intelligenza artificiale (AI) di facile utilizzo che tiene traccia di molteplici caratteristiche della crescita delle radici. Creato da Talmo Pereira, membro del Salk, SLEAP è stato inizialmente progettato per monitorare i movimenti degli animali in laboratorio. Ora, Pereira ha collaborato con lo scienziato vegetale e collega di Salk, il professor Wolfgang Busch, per applicare SLEAP alle piante.

In uno studio pubblicato su Fenomica vegetale il 12 aprile 2024, Busch e Pereira lanciano un nuovo protocollo per l’utilizzo di SLEAP per analizzare i fenotipi delle radici delle piante: quanto crescono in profondità e in larghezza, quanto diventano massicci i loro sistemi radicali e altre qualità fisiche che, prima di SLEAP, erano noiose da analizzare. misurare. L’applicazione di SLEAP alle piante ha già consentito ai ricercatori di creare il più ampio catalogo di fenotipi del sistema radicale delle piante fino ad oggi.

Inoltre, il monitoraggio di queste caratteristiche fisiche del sistema radicale aiuta gli scienziati a trovare geni affiliati a tali caratteristiche, nonché se più caratteristiche radicali sono determinate dagli stessi geni o in modo indipendente. Ciò consente al team Salk di determinare quali geni sono più vantaggiosi per la progettazione delle loro piante.

“Questa collaborazione è davvero una testimonianza di ciò che rende la scienza del Salk così speciale e di grande impatto”, afferma Pereira. “Non stiamo semplicemente ‘prendendo in prestito’ da diverse discipline: le stiamo davvero mettendo su un piano di parità per creare qualcosa di più grande della somma delle sue parti.”

Prima di utilizzare SLEAP, il monitoraggio delle caratteristiche fisiche sia delle piante che degli animali richiedeva molto lavoro che rallentava il processo scientifico. Se i ricercatori volessero analizzare l’immagine di una pianta, dovrebbero contrassegnare manualmente le parti dell’immagine che erano e non erano piante: fotogramma per fotogramma, parte per parte, pixel per pixel. Solo allora si potrebbero applicare i vecchi modelli di intelligenza artificiale per elaborare l’immagine e raccogliere dati sulla struttura della pianta.

Ciò che distingue SLEAP è il suo uso unico sia della visione artificiale (la capacità dei computer di comprendere le immagini) che del deep learning (un approccio AI per addestrare un computer ad apprendere e lavorare come il cervello umano). Questa combinazione consente ai ricercatori di elaborare le immagini senza spostarsi pixel per pixel, saltando invece questo passaggio intermedio ad alta intensità di lavoro per passare direttamente dall’input dell’immagine alle caratteristiche definite della pianta.

“Abbiamo creato un protocollo robusto convalidato in più tipi di impianti che riduce i tempi di analisi e gli errori umani, sottolineando al contempo l’accessibilità e la facilità d’uso — E non ha richiesto modifiche al software SLEAP vero e proprio,” afferma la prima autrice Elizabeth Berrigan, analista di bioinformatica nel laboratorio di Busch.

Senza modificare la tecnologia di base di SLEAP, i ricercatori hanno sviluppato un kit di strumenti scaricabile per SLEAP chiamato saltare le radici (disponibile come software open source qui). Con saltare le radici, SLEAP può elaborare i tratti biologici dei sistemi radicali come profondità, massa e angolo di crescita. Il team Salk ha testato il saltare le radici pacchetto in una varietà di piante, comprese piante coltivate come soia, riso e colza, nonché specie vegetali modello Arabidopsis thaliana – un’erbaccia da fiore della famiglia della senape. Attraverso la varietà di piante testate, hanno scoperto che il nuovo metodo basato su SLEAP ha sovraperformato le pratiche esistenti annotando 1,5 volte più velocemente, addestrando il modello AI 10 volte più velocemente e prevedendo la struttura della pianta su nuovi dati 10 volte più velocemente, il tutto con la stessa o migliore precisione di prima.

Insieme ai massicci sforzi di sequenziamento del genoma per chiarire i dati genotipici in un gran numero di varietà di colture, questi dati fenotipici, come il sistema radicale di una pianta che cresce particolarmente in profondità nel suolo, possono essere estrapolati per comprendere i geni responsabili della creazione di quel sistema radicale particolarmente profondo.

Questo passaggio – collegare fenotipo e genotipo – è cruciale nella missione di Salk di creare piante che trattengano più carbonio e più a lungo, poiché tali piante avranno bisogno di sistemi radicali progettati per essere più profondi e più robusti. L’implementazione di questo software accurato ed efficiente consentirà alla Harnessing Plants Initiative di collegare fenotipi desiderabili a geni selezionabili con facilità e velocità rivoluzionarie.

“Siamo già stati in grado di creare il catalogo più ampio di fenotipi del sistema radicale delle piante fino ad oggi, il che sta davvero accelerando la nostra ricerca per creare piante che catturano il carbonio e combattono il cambiamento climatico”, afferma Busch, titolare della cattedra Hess in Plant Science a Salk. “SLEAP è stato facilissimo da applicare e utilizzare, grazie alla progettazione software professionale di Talmo, e in futuro diventerà uno strumento indispensabile nel mio laboratorio.”

Accessibilità e riproducibilità erano in prima linea nella mente di Pereira durante la creazione di SLEAP e saltare le radici. Perché il software e saltare le radici toolkit sono gratuiti, i ricercatori sono entusiasti di vedere come saltare le radici verrà utilizzato in tutto il mondo. Hanno già avviato discussioni con gli scienziati della NASA sperando di utilizzare lo strumento non solo per aiutare a guidare le piante che sequestrano il carbonio sulla Terra, ma anche per studiare le piante nello spazio.

A Salk, il team collaborativo non è ancora pronto a sciogliersi: si sta già imbarcando in una nuova sfida di analisi dei dati 3D con SLEAP. Gli sforzi per perfezionare, espandere e condividere SLEAP e saltare le radici continuerà negli anni a venire, ma il suo utilizzo nella Harnessing Plants Initiative di Salk sta già accelerando la progettazione degli impianti e aiutando l’Istituto ad avere un impatto sul cambiamento climatico.

Altri autori includono Lin Wang, Hannah Carrillo, Kimberly Echegoyen, Mikayla Kappes, Jorge Torres, Angel Ai-Perreira, Erica McCoy, Emily Shane, Charles Copeland, Lauren Ragel, Charidimos Georgousakis, Sanghwa Lee, Dawn Reynolds, Avery Talgo, Juan Gonzalez, Ling Zhang, Ashish Rajurkar, Michel Ruiz, Erin Daniels, Liezl Maree e Shree Pariyar di Salk.

Il lavoro è stato sostenuto dal Bezos Earth Fund, dalla Hess Corporation, dal TED Audacious Project e dal National Institutes of Health (RF1MH132653).



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