I ricercatori hanno sviluppato nanoparticelle in grado di penetrare nella retina neurale e fornire mRNA alle cellule dei fotorecettori il cui corretto funzionamento rende possibile la visione.

Gli scienziati dell’Oregon State University College of Pharmacy hanno dimostrato in modelli animali la possibilità di utilizzare nanoparticelle lipidiche e RNA messaggero, la tecnologia alla base dei vaccini COVID-19, per trattare la cecità associata a una rara condizione genetica.

Lo studio è stato pubblicato oggi (11 gennaio 2023) sulla rivista I progressi della scienza. È stato guidato dal professore associato di scienze farmaceutiche dell’OSU Gaurav Sahay, dallo studente di dottorato dell’Oregon State Marco Herrera-Barrera e dall’assistente professore di oftalmologia dell’Oregon Health & Science University Renee Ryals.

Gli scienziati hanno superato quella che era stata la principale limitazione dell’utilizzo di nanoparticelle lipidiche, o LNP, per trasportare materiale genetico ai fini della terapia della vista, facendole raggiungere la parte posteriore dell’occhio, dove si trova la retina.

I lipidi sono acidi grassi e composti organici simili tra cui molti oli e cere naturali. Le nanoparticelle sono minuscoli pezzi di materiale di dimensioni variabili da uno a 100 miliardesimi di metro. L’RNA messaggero fornisce istruzioni alle cellule per produrre una particolare proteina.

Con i vaccini contro il coronavirus, l’mRNA trasportato dagli LNP istruisce le cellule a creare un pezzo innocuo della proteina spike del virus, che innesca una risposta immunitaria dal corpo. Come terapia per la compromissione della vista derivante dalla degenerazione retinica ereditaria, o IRD, l’mRNA istruirebbe le cellule dei fotorecettori – difettose a causa di una mutazione genetica – a produrre le proteine ​​necessarie per la vista.

L’IRD comprende un gruppo di disturbi di varia gravità e prevalenza che colpiscono una persona su poche migliaia in tutto il mondo.

Gli scienziati hanno dimostrato, in una ricerca che ha coinvolto topi e primati non umani, che gli LNP dotati di peptidi erano in grado di passare attraverso le barriere negli occhi e raggiungere la retina neurale, dove la luce viene trasformata in segnali elettrici che il cervello converte in immagini.

“Abbiamo identificato un nuovo set di peptidi che possono raggiungere la parte posteriore dell’occhio”, ha detto Sahay. “Abbiamo usato questi peptidi per agire come codici postali per consegnare nanoparticelle che trasportano materiali genetici all’indirizzo previsto all’interno dell’occhio”.

“I peptidi che abbiamo scoperto possono essere usati come ligandi mirati direttamente coniugati a RNA silenzianti, piccole molecole per terapie o come sonde di imaging”, ha aggiunto Herrera-Barrera.

Sahay e Ryals hanno ricevuto una sovvenzione di 3,2 milioni di dollari dal National Eye Institute per continuare a studiare la promessa delle nanoparticelle lipidiche nel trattamento della cecità ereditaria. Condurranno la ricerca sull’uso degli LNP per fornire uno strumento di editing genetico che potrebbe eliminare i geni cattivi nelle cellule dei fotorecettori e sostituirli con geni correttamente funzionanti.

La ricerca mira a sviluppare soluzioni per le limitazioni associate all’attuale principale mezzo di consegna per l’editing genetico: un tipo di virus noto come virus adeno-associato o AAV.

“L’AAV ha una capacità di confezionamento limitata rispetto agli LNP e può provocare una risposta del sistema immunitario”, ha affermato Sahay. “Inoltre, non funziona in modo fantastico nel continuare a esprimere gli enzimi che lo strumento di modifica utilizza come forbici molecolari per eseguire tagli nel DNA da modificare. Speriamo di utilizzare ciò che abbiamo appreso finora sugli LNP per sviluppare un sistema di consegna dell’editor di geni migliorato”.

Riferimento: “Le nanoparticelle lipidiche guidate da peptidi forniscono mRNA alla retina neurale di roditori e primati non umani” 11 gennaio 2023, I progressi della scienza.
DOI: 10.1126/sciadv.add4623

Lo studio LNP guidato dai peptidi è stato finanziato dal National Institutes of Health. Hanno partecipato alla ricerca per l’Oregon State anche i docenti del College of Pharmacy Oleh Taratula e Conroy Sun, i ricercatori post-dottorato Milan Gautam e Mohit Gupta, gli studenti di dottorato Antony Jozic e Madeleine Landry, l’assistente di ricerca Chris Acosta e lo studente universitario Nick Jacomino, uno studente di bioingegneria al College di Ingegneria che si è laureata nel 2020.

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Scienze & AmbienteBiologia sintetica per strumenti diagnostici a basso costo

Biologia sintetica per strumenti diagnostici a basso costo

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Justin Vigar e i suoi colleghi stanno creando una piattaforma cartacea personalizzabile per lo screening rapido del COVID-19 e di altre malattie infettive utilizzando la biologia sintetica.

Biologia sintetica” potrebbe sembrare una contraddizione in termini, ma lo studente laureato dell’Università di Toronto Justin Vigar ritiene che possa migliorare la salute e la vita delle persone in tutto il mondo.

Nuova applicazione della biologia sintetica: Justin Vigar, qui raffigurato in un laboratorio in Sud America, sta sviluppando strumenti diagnostici basati su carta, come il chip di carta mostrato a destra, dove ogni punto rappresenta un test diverso.

Nuova applicazione della biologia sintetica: Justin Vigar, qui raffigurato in un laboratorio in Sud America, sta sviluppando strumenti diagnostici basati su carta, come il chip di carta mostrato a destra, dove ogni punto rappresenta un test diverso. Credito immagine: Università di Toronto

Un campo di ricerca relativamente nuovo, la biologia sintetica applica principi ingegneristici per ricreare sistemi biologici completamente funzionali. Nel caso di Vigar, sta utilizzando l’approccio per sviluppare strumenti diagnostici rapidi e a basso costo per combattere le malattie infettive come destinatario di un premio di dottorato dal Consorzio Infezioni Emergenti e Pandemiche (EPIC) – uno dei tanti U di T iniziative strategiche istituzionali.

Oggi, il gold standard per la diagnosi di molte malattie infettive è la PCR quantitativa a trascrizione inversa in tempo reale (RT-qPCR), che è allo stesso tempo sensibile e sufficientemente specifica da rilevare piccole quantità di un particolare microbo in un campione di un paziente.

Tuttavia, il processo è complesso, richiede attrezzature e materiali costosi e deve essere eseguito da personale altamente qualificato.

“Parliamo molto del Sud America e di altri paesi del Sud del mondo, ma nella maggior parte delle aree del Canada, inclusa l’Alberta rurale dove sono cresciuto, non c’è accesso alla RT-qPCR”, afferma Vigar, uno studente di dottorato del quarto anno che è lavorando con Keith Pardeeprofessore associato presso la Facoltà di Farmacia di Leslie Dan.

La mancanza di accesso ai test RT-qPCR è stata particolarmente evidente durante la pandemia di COVID-19, quando molti paesi a basso e medio reddito hanno faticato a monitorare la diffusione della SARS-CoV-2 all’interno dei propri confini perché non disponevano delle infrastrutture e delle competenze necessarie per monitorare la diffusione della SARS-CoV-2 all’interno dei propri confini. e risorse per condurre test RT-qPCR tempestivi per i loro cittadini.

I test antigenici rapidi hanno contribuito a riempire il vuoto, ma non sono così sensibili e non possono essere facilmente ampliati per elaborare centinaia di campioni contemporaneamente.

“Volevamo colmare questa lacuna costruendo strumenti realmente accessibili che potessero effettuare uno screening rapido per COVID-19 e altre infezioni – qualcosa che sarebbe una via di mezzo tra un test rapido dell’antigene e RT-qPCR”, afferma Vigar.

A tal fine, lui e i suoi colleghi di laboratorio stanno utilizzando la biologia sintetica per creare una piattaforma cartacea personalizzabile che utilizza foglietti di carta tascabili con circuiti genetici incorporati. Il circuito è costruito liofilizzando proteine ​​e altri componenti molecolari, che funzionano come amplificatori e sensori, direttamente sulla carta. I campioni dei pazienti vengono elaborati minimamente per estrarre il materiale genetico e applicati direttamente sulla carta.

Se il campione del paziente contiene materiale genetico dell’agente patogeno di interesse, il circuito si accenderà e produrrà un cambiamento di colore sulla carta, che l’occhio nudo può individuare.

Il team di Pardee ha già dimostrato l’efficacia del proprio strumento diagnostico cartaceo nel migliorare la sorveglianza della malattia durante l’epidemia del virus Zika in Brasile nel 2015-2016 e, più recentemente, durante la pandemia di COVID-19.

Ora Vigar sta lavorando con collaboratori in altri paesi dell’America Latina e in India per espandere l’uso dello strumento diagnostico per monitorare altre malattie infettive come la febbre dengue e la leishmaniosi, causata dall’infezione Leishmania parassita.

“Il sistema funziona molto bene a Toronto e in un paio di paesi con cui collaboriamo, ma la sfida ora è reperire i materiali da incorporare nel documento e ampliarlo in altri paesi”, dice Vigar.

Sebbene sia facile per Vigar ottenere i componenti e costruire i dispositivi cartacei a Toronto e spedirli ai collaboratori in tutto il mondo, il suo obiettivo finale è consentire loro di produrre e distribuire localmente questi strumenti di biologia sintetica.

“Dobbiamo lavorare con i ricercatori di altri paesi per costruire una rete che dia loro accesso a questi reagenti e materiali in modo che non facciano affidamento su di noi per spedirli loro. Quindi saranno in grado di costruire le proprie condutture per rilevare gli agenti patogeni e le malattie a cui sono interessati”.

Vigar è stato in Cile per due settimane l’estate scorsa per aiutare i ricercatori locali a testare la riproducibilità dei propri test cartacei. Il laboratorio di Pardee ha recentemente ospitato anche due studenti in visita dall’Universidad de Los Andes in Colombia per apprendere il processo di costruzione dei dispositivi a basso costo.

Oltre a monitorare le malattie infettive negli esseri umani, Vigar afferma che le piattaforme cartacee vengono utilizzate per rispondere ad altre domande importanti, ad esempio monitorare la diffusione di un parassita agricolo o i movimenti di una specie in via di estinzione.

La passione di Vigar per la biologia sintetica e per garantire un accesso equo alle nuove biotecnologie si estende oltre il laboratorio.

È un delegato attivo alla Convenzione delle Nazioni Unite sulla biodiversità (UNCBD), che comprende due accordi internazionali sulla biosicurezza e sulla condivisione degli utili relativi alla biologia sintetica e alla biotecnologia.

Come partecipante alla Conferenza delle parti (COP) dell’UNCBD a Sharm El-Sheikh, in Egitto, nel 2018, e a Montreal nel 2022, ha istruito i partecipanti sulla biologia sintetica e ha condiviso la sua prospettiva su come la diagnostica a basso costo può migliorare la vita delle persone. Intorno al mondo.

“Queste tecnologie sono molto potenti ma sono limitate nel luogo e nel modo in cui vengono utilizzate. Vogliamo renderlo più accessibile e, se lavoriamo in modo collaborativo verso questo obiettivo, andranno a beneficio molte più persone”.

Fonte: Università di Toronto



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